การพัฒนาอิมมูโนเซนเซอร์สำหรับวิเคราะห์หาสารบ่งชี้มะเร็ง

Abstract

งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาวิธีวิเคราะห์หาปริมาณคาร์ซิโนเอมบริโอนิก แอนติเจน (ซีอีเอ) ด้วยเทคนิคอิมมูโนเซนเซอร์แบบแซนวิช โดยใช้แมกเนติกบีดเพื่อขยายสัญญาณวิเคราะห์ หลักการของเทคนิคนี้อาศัยการจับกันอย่างจำเพาะเจาะจงของแอนติบอดีกับแอนติเจนของซีอีเอ ตรวจวัดความเข้มข้นของซีอีเอได้โดยใช้เอนไซม์เปอร์ออกซิเดสเป็นสารติดฉลาก เมื่อเติมสาร สับสเตรทจะเกิดผลิตภัณฑ์เป็นสีน้ำเงิน และเมื่อหยุดปฏิกิริยาด้วยกรดซัลฟิวริกได้สารละลายสีเหลือง สัญญาณค่าการดูดกลืนแสงที่ได้จะแปรผันตรงตามความเข้มข้นของซีอีเอ เริ่มต้นศึกษาหาสภาวะที่มีผลต่อประสิทธิภาพของวิธีนี้ พบว่าความเข้มข้นของแอนติบอดี ตัวที่หนึ่งที่เหมาะสมเท่ากับ 0.1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร เวลาในการเกิดปฏิกิริยา 60 นาที ความเข้มข้น ของแมกเนติกบีดที่ตรึงด้วยแอนติบอดีติดฉลากด้วยไบโอตินและความเข้มข้นของสเตร็ปตาวิดิน- เปอร์ออกซิเดสที่เหมาะสมเท่ากับ 0.5 และ 0.01 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ตามลำดับ ภายใต้สภาวะที่ เหมาะสม พบว่าวิธีนี้มีความเที่ยง ความถูกต้องและความจำเพาะเจาะจงสูง ให้ช่วงความเป็นเส้นตรง จาก 0.05 ถึง 50 นาโนกรัมต่อมิลลิลิตร และมีขีดจำกัดการตรวจวัด 0.005 นาโนกรัมต่อมิลลิลิตร สุดท้ายประยุกต์ใช้วิธีนี้เพื่อวิเคราะห์หาความเข้มข้นของซีอีเอในตัวอย่างซีรั่ม นำผลการ ทดลองที่ได้เปรียบเทียบกับวิธีมาตรฐานโดยใช้สถิติ ที-เทส พบว่าทั้งสองวิธีไม่มีความแตกต่างกัน อย่างมีนัยสำคัญ ที่ระดับความเชื่อมั่น 95 เปอร์เซ็นต์ (P=0.05) สรุปได้ว่าวิธีวิเคราะห์นี้มีข้อดีคือ มี ความไววิเคราะห์สูง ลดค่าใช้จ่ายในการวิเคราะห์และลดการนำเข้าของชุดทดสอบจากต่างประเทศ